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研究人员制定了快速有效的N磷酸肽富集策略

N磷酸化蛋白在原核生物的中枢代谢和二元/多组分信号传导中起着关键作用。此外,它作为某些重要酶的中间体存在于哺乳动物中。然而,由于在酸性条件下PN键的固有不稳定性,当前的O-磷酸肽的富集方法对于N-磷酸肽不是优选的。因此,有效的N-磷酸蛋白质组分析仍然具有挑战性。

最近,由张立华教授和Pro领导的研究小组。科学院大连化学物理研究所(DICP)的张玉奎提出了一种快速有效的N-磷酸肽富集策略。

他们的研究发表在12月4日的《自然通讯》上。

受天然磷酸酶的启发,磷酸酶可提供特定的Zn(II)中心酶结合口袋来结合底物的磷酸酯单元,研究人员设计了双(zinc(II)-dipicolylamine)分子(DpaZn)用于中性条件下的磷酸靶识别。

结合亚2μm核壳二氧化硅微球的快速传质能力,设计了DpaZn功能化的亚2μm核壳二氧化硅微球(SiO 2 @DpaZn)在中性条件下富集尖端N-磷酸肽。从HeLa细胞裂解物中总共鉴定出3,384个N-pho位点,包含611个pHis,1618 pLys和1155 pArg。

新的N-磷酸化蛋白质组分析方法不仅为深入研究其生物学功能提供了基础数据,而且为促进精密医学,合成生物学等领域的发展提供了技术支持。

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